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細(xì)胞計數(shù)時如何選擇赤蘚紅素 B 和比臺盼藍(lán)?

更新時間:2025-05-30      點擊次數(shù):295

細(xì)胞計數(shù)對于細(xì)胞濃度和活力的可重現(xiàn)和準(zhǔn)確記錄非常重要,可用于一系列研究、醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)應(yīng)用。盡管臺盼藍(lán)存在許多記錄在案的問題和局限性,但它仍然被廣泛用于許多研究實驗室。本文旨在重點介紹赤蘚紅素 B,這是一種毒性較小且無憂的臺盼藍(lán)細(xì)胞活力染料替代品。

了解臺盼藍(lán)

但首先,讓我們了解臺盼藍(lán)的局限性。該列表的最頂部是臺盼藍(lán)對人和細(xì)胞的毒性。臺盼藍(lán)會因染料吸收而隨著時間的推移降低細(xì)胞活力。建議在混合樣品后盡快計數(shù)細(xì)胞。大量研究還表明,臺盼藍(lán)具有潛在致癌性,可導(dǎo)致細(xì)胞周期和細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)發(fā)生變化 (1-6)。因此,它被貼上了對動物和環(huán)境有害的標(biāo)簽。

臺盼藍(lán)在儲存過程中容易沉淀,在血球計數(shù)器和/或自動細(xì)胞計數(shù)儀上計數(shù)時可能表現(xiàn)為碎片。保持臺盼藍(lán)的清潔需要加熱、過濾或離心以去除晶體,以避免干擾細(xì)胞計數(shù)或錯誤表征細(xì)胞。此外,細(xì)胞樣品中存在碎片使得區(qū)分無核細(xì)胞與真碎片、死細(xì)胞或晶體極為困難。由于這些限制,它可能導(dǎo)致個體高度主觀計數(shù)和自動細(xì)胞計數(shù)不準(zhǔn)確。對于活力低于 80% 的樣品尤其如此。此外,臺盼藍(lán)還可以與培養(yǎng)基或血清中的蛋白質(zhì)結(jié)合,這會干擾其與死細(xì)胞的適當(dāng)結(jié)合親和力。

以上所有情況都可能導(dǎo)致在研究的許多關(guān)鍵點為優(yōu)化或標(biāo)準(zhǔn)化用于藥物開發(fā)、細(xì)胞治療或數(shù)據(jù)生成的方案收集的數(shù)據(jù)不一致。

介紹赤蘚紅 B,臺盼藍(lán)的替代品

介紹赤蘚紅素 B,一個更好、更明亮的選擇! 赤蘚紅素 B 在國際上用作低劑量的食品添加劑,被歸類為無毒。它是一種生物安全染料,用于染料排斥測試以測量細(xì)胞活力。與臺盼藍(lán)類似,該測定基于以下原理:具有完整細(xì)胞膜的活細(xì)胞會排除染料的極性分子并保持未染色,而膜受損的死細(xì)胞則不會,因此看起來更暗。

赤蘚紅 B 細(xì)胞活力檢測依賴于與臺盼藍(lán)檢測相同的原理,其中活細(xì)胞排除染料,而受損細(xì)胞被染色。然而,與臺盼藍(lán)相比,赤蘚紅素 B 的一些優(yōu)勢包括與細(xì)胞混合時毒性較低、在不同溫度和儲存條件下的穩(wěn)定性以及減少血清蛋白的結(jié)合。赤蘚紅素 B 相對于臺盼藍(lán)的這些優(yōu)勢顯著減少了在細(xì)胞活力和群體密度測定過程中導(dǎo)致細(xì)胞錯誤表征的變量。這會產(chǎn)生更準(zhǔn)確和可靠的計數(shù)。

可以理解的是,一些研究人員仍然對從臺盼藍(lán)染色轉(zhuǎn)向赤蘚紅 B 染色心存疑慮,因為臺盼藍(lán)歷來是細(xì)胞計數(shù)的黃金標(biāo)準(zhǔn)方法。這通常是由于他們不愿意更改當(dāng)前的協(xié)議。然而,赤蘚紅 B 可以使用相同的檢測方案、硬件和類似的儀器設(shè)置來替代臺盼藍(lán)。臺盼藍(lán)和赤蘚紅素 B 之間也沒有顯著的價格差異。

結(jié)論

赤蘚紅素 B 是臺盼藍(lán)的毒性較小的替代品,具有多種優(yōu)勢,可實現(xiàn)更可靠的細(xì)胞計數(shù)。雖然臺盼藍(lán)是細(xì)胞計數(shù)的傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)品,但研究表明,赤蘚紅 B 是一種易于使用、成本效益高且毒性較小的替代品。




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